SIST ISO 11264:2006

SLOVENSKI STANDARD
SIST ISO 11264:2006
01-september-2006
.DNRYRVWWDO±'RORþHYDQMHKHUELFLGRY±0HWRGDWHNRþLQVNHNURPDWRJUDILMHYLVRNH
ORþOMLYRVWL]XOWUDYLMROLþQRGHWHNFLMR
Soil quality -- Determination of herbicides -- Method using HPLC with UV-detection
Qualité du sol -- Dosage des herbicides -- Méthode par CLHP avec détection par UV
Ta slovenski standard je istoveten z: ISO 11264:2005
ICS:
13.080.10 .HPLMVNH]QDþLOQRVWLWDO Chemical characteristics of
soils
SIST ISO 11264:2006 en
2003-01.Slovenski inštitut za standardizacijo. Razmnoževanje celote ali delov tega standarda ni dovoljeno.

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SIST ISO 11264:2006

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SIST ISO 11264:2006


INTERNATIONAL ISO
STANDARD 11264
First edition
2005-05-01

Soil quality — Determination of
herbicides — Method using HPLC with
UV-detection
Qualité du sol — Dosage des herbicides — Méthode par CLHP avec
détection par UV




Reference number
ISO 11264:2005(E)
©
ISO 2005

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SIST ISO 11264:2006
ISO 11264:2005(E)
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SIST ISO 11264:2006
ISO 11264:2005(E)
Contents Page
Foreword. iv
1 Scope. 1
2 Normative reference . 1
3 Principle . 1
4 Reagents . 1
5 Apparatus. 4
6 Procedure. 5
6.1 Sample preparation. 5
6.2 Sample preservation and pretreatment . 5
6.3 Addition of water to the sample . 5
6.4 Preparation of soil extract. 6
6.5 HPLC-determination . 6
7 Calculation. 9
7.1 Calculation of the mass concentration ρ of the substance in extract solution E2
EX
according to Equation (2). 9
7.2 Calculation of the content w of the substance in the soil extract solution E2 according to
Equation (3) . 10
7.3 Expression of results. 10
8 Test report. 10
9 Accuracy . 10
Annex A (informative) Chromatograms. 11
Annex B (normative) Validation . 13
Annex C (informative) Additional compounds which were tested with this method
(see 6.4 and 6.5) . 16
Bibliography . 17

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SIST ISO 11264:2006
ISO 11264:2005(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 11264 was prepared by Technical Committee ISO/TC 190, Soil quality, Subcommittee SC 3, Chemical
methods and soil characteristics.

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SIST ISO 11264:2006
INTERNATIONAL STANDARD ISO 11264:2005(E)

Soil quality — Determination of herbicides — Method using
HPLC with UV-detection
1 Scope
This International Standard specifies a high-performance liquid chromatography (HPLC) method for qualitative
and quantitative determination of herbicides of various substance classes in soils. This method covers
triazines including their related metabolites, phenyl urea compounds and other herbicides. Compounds are
identified and quantified with UV-detection.
The limit of detection for triazines and phenyl urea compounds is ~ 0,01 mg/kg dry matter. It is dependent
upon both the compound and the soil matrix.
2 Normative reference
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated
references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced
document (including any amendments) applies.
ISO 10381-1, Soil quality — Sampling —- Part 1: Guidance on the design of sampling programmes
ISO 10381-2, Soil quality — Sampling — Part 2: Guidance on sampling techniques
ISO 11465, Soil quality — Determination of dry matter and water content on a mass basis — Gravimetric
method
ISO 14507, Soil quality — Pretreatment of samples for determination of organic contaminants
3 Principle
The field-moist soil sample is extracted with a mixture of acetone and water (2:1). After addition of NaCl and
dichloromethane or petroleum, the isolated organic phase is concentrated and transferred to a
acetonitrile/water mixture and without further clean-up is analysed using RP-HPLC, gradient of acetonitrile and
water, with UV-detection. Results can be confirmed using diode array UV spectra, GC-MS, GC-NPD or
GC-AED (some may need derivatisation).
4 Reagents
All reagents shall be of known analytical grade. The purity of the reagents used shall be checked by running a
blank determination as described in 6.5. If the blank value is unreasonably high, i.e. more than 10 % of the
lowest value of interest, find the cause through a step-by-step examination of the whole procedure. For
measurements at the limit of determination, even reagents suitable for residue analyses may not fulfil this
criterion. In this case, sufficient blank determinations shall be incorporated in each series of samples.
4.1 Water, for residue analysis, normally tap water (drinking water) is suitable.
4.2 Acetone, for residue analysis.
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SIST ISO 11264:2006
ISO 11264:2005(E)
4.3 Sodium chloride.
4.4 Dichloromethane, for residue analysis.
4.5 Petroleum ether, boiling range 40 °C to 60 °C, for residue analysis.
4.6 Sodium sulfate, anhydrous, for residue analysis.
4.7 Acetonitrile, HPLC grade.
4.8 Water, HPLC grade.
4.9 2-propanol, for chromatography.
4.10 Acetonitrile (4.7)/water (4.8) mixture, 1 + 1 (V + V) for dissolving the sample.
4.11 Methanol, HPLC grade.
4.12 Standard substances (including Chemical Abstracts Number).
Alachlor [015972-60-8], Atrazine [001912-24-9], Atrazine-desethyl [06190-65-4], Atrazine-desisopropyl
[01007-28-9], Bromacil [000314-40-9], Chlortoluron [015545-48-9], Chloroxuron [001982-47-4], Cyanazine
[021725-46-2], Dichlobenil [001194-65-6], Diuron [000330-54-1], Ethofumesate [026225-79-6], Hexazinon
[051235-04-2], Isoproturon [034123-59-6], Metazachlor [061729-08-2], Metamitron [041394-05-2],
Metabenzthiazuron [018691-97-9], Metobromuron [003060-89-7], Metolachlor [051218-45-2], Metoxuron
[019937-59-8], Monuron [000150-68-5], Pendimethalin [040487-42-1], Propazine [000139-40-2], Propyzamide
[023950-58-5], Sebuthylazine [00728-69-3], Simazine [000122-34-9], Terbutryn [000886-50-0], Terbutylazine
[005915-41-3].
4.13 Standard solutions for HPLC determination
4.13.1 Stock solutions, ρ = 1 mg/ml
11
Weigh 10,0 mg of each standard substance (4.12) and place in individual 10 ml measuring flasks (5.13).
Dissolve with 2-propanol (4.9) or, in the case of sebuthylazine and simazine, with small portions of acetone
(4.2) or, in the case of metamitron, with methanol (4.11). Then make up to the mark with 2-propanol (4.9).
4.13.2 Intermediate dilutions, ρ = 100 µg/ml
12
Pipette 1,0 ml of each of the stock solutions (4.13.1) into an individual 10 ml measuring flask (5.13) and make
up to the mark with 2-propanol (4.9).
4.13.3 Working solutions I, ρ = 10 µg/ml
13
NOTE Working solutions are made to establish the retention time. Different concentrations are made because the
analytes have different detector responses.
Pipette 1,0 ml of each of the intermediate dilutions (4.13.2) into an individual 10 ml measuring flask (5.13) and
make up to the mark with acetonitrile/water mixture (4.10).
4.13.4 Working solutions ll, ρ = 1 µg/ml
14
Transfer, with a microlitre syringe (5.14), 100 µl of each of the intermediate dilutions (4.13.2) into a 10 ml
measuring flask (5.13) and make up to the mark with acetonitrile/water mixture (4.10).
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SIST ISO 11264:2006
ISO 11264:2005(E)
4.13.5 Working solutions lll, ρ = 0,1 µg/ml
15
Transfer, with a microlitre syringe (5.14), 100 µl of working solution I (4.13.3) into a 10 ml measuring flask
(5.13) and make up to the mark with acetonitrile/water mixture (4.10).
4.13.6 Mixed solutions I, ρ = 5 µg/ml to 100 µg/ml
16
According to Table 1, transfer with a microlitre syringe (5.14), between 50 µI and 1 000 µl of the stock
solutions (4.13.1) into a 10 ml measuring flask (5.13) and make up to the mark with 2-propanol (4.9).
4.13.7 Mixed solutions ll, ρ = 0,5 µg/ml to 10 µg/ml
17
Pipette 1,0 ml of the mixed solution I (4.13.6) into a 10 ml measuring flask (5.13) and make up to the mark
with acetonitrile/water mixture (4.10) (see Table 1).
4.13.8 Mixed solutions III, ρ = 0,05 µg/ml to 1 µg/ml
18
Pipette 1,0 ml of the mixed solution ll (4.13.7) into a 10 ml measuring flask (5.13) and make up to the mark
with acetonitrile/water mixture (4.10).
Table 1 — Concentration of compounds of mixed solutions I (4.13.6), II (4.13.7) and III (4.13.8)

a
b
No. Compound
Volume Mixed solution I Mixed solution II Mixed solution III
µl µg/ml µg/ml µg/ml
1 Atrazine-desisopropyl 200 20 2 0,2
2 Metamitron 500 50 5 0,5
3 Atrazine-desethyl 200 20 2 0,2
4 Hexazinon 200 20 2 0,2
5 Metoxuron 200 20 2 0,2
6 Bromacil 400 40 4 0,4
7 Simazine 100 10 1 0,1
8 Monuron 100 10 1 0,1
9 Cyanazine 100 10 1 0,1
10 Methabenzthiazuron 100 10 1 0,1
11 Chlortoluron 100 10 1 0,1
12 Atrazine 100 10 1 0,1
13 Isoproturon 100 10 1 0,1
14 Diuron 200 20 2 0,2
15 Metobromuron 100 10 1 0,1
16 Metazachlor 500 50 5 0,5
17 Sebuthylazine 100 10 1 0,1
18 Propazine 100 10 1 0,1
19 Dichlobenil 200 20 2 0,2
20 Terbutylazine 100 10 1 0,1
21 Chloroxuron 100 10 1 0,1
22 Propyzamide 100 10 1 0,1
23 Terbutryn 50 5 0,5 0,05
24 Ethofumesate 500 50 5 0,5
25 Metolachlor 500 50 5 0,5
26 Alachlor 1 000 100 10 1
27 Pendimethalin 100 10 1 0,1
a
Compounds are in elution order using the conditions stated in 6.5. For additional compounds, see Annex C.

b
Volume to be taken from the stock solution (4.13.1) to prepare 10 ml of the mixed solution I (4.13.6).
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SIST ISO 11264:2006
ISO 11264:2005(E)
5 Apparatus
5.1 Glass bottles, with screw cap and sealing ring of polytetrafluor ethylene, nominal capacity 250 ml and
1 000 ml.
5.2 Extraction apparatus (see Figure 1), consisting of the following.
5.2.1 Measuring cylinder, of 1 000 ml nominal volume with ground neck and ground-glass stopper.
5.2.2 Ground-glass insert (wash-bottle principle) with adjustable U-tube, the bent end of which can be
placed at the interface between the two phases.
Key
1 Ground-glass insert
2 Measuring cylinder
3 Adjustable U-tube
4 Organic phase
5 Water phase and soil

Figure 1 — Extraction apparatus
5.3 Shaking apparatus, head-over-head or horizontal. Complete mixing of the soil and extractant should
be obtained.
5.4 Vacuum rotating evaporator, with water bath and vacuum control.
5.5 Pear-shaped flask, of 10 ml nominal volume, with graduations at 0,5 ml and 1,0 ml and a ground-glass
stopper.
5.6 Membrane filter, porosity at least 0,45 µm, solvent-resistant.
5.7 Test tube, of 2 ml nominal volume, sealable, with polytetrafluor ethylene disc.
5.8 HPLC apparatus, consisting of high-pressure pumps with gradient programmer, injection valve of 20 µl
to 50 µI, column thermostat, solvent de-gassing device.
4 © ISO 2005 – All rights reserved

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SIST ISO 11264:2006
ISO 11264:2005(E)
5.9 UV-detector, with variable wavelengths or diode array detector (DAD).
5.10 Electronic recording device (integrator or laboratory data system).
5.11 Separation column, length 250 mm, inner diameter 4 mm, and pre-column holders (see 6.5.1).
5.12 Pre-column, length 4 mm, inner diameter 4 mm (see 6.5.1)
5.13 Measuring flasks, 10 ml nominal volume, with glass stopper.
5.14 Microlitre syringe, 50 µl to 1 000 µl.
5.15 Ultrasonic bath or vortex mixer.
6 Procedure
6.1 Sample preparation
Obtain representative field-moist soil samples in accordance with ISO 10381-1, using sampling apparatus in
accordance with ISO 10381-2.
6.2 Sample preservation and pretreatment
Field-moist samples shall be pretreated in accordance with ISO 14507 as soon as possible (no chemical
drying).
Store the samples in a dark place at a temperature below − 20 °C. Herbicides may be subject to microbial
conversion under certain conditions. It is recommended that samples be frozen, if they are stored for more
than 2 days.
Determine the water and dry matter contents of a subpart of the sample in accordance with ISO 11465.
6.3 Addition of water to the sample
Add to the soil mass a specific mass of water calculated according to Equation (1) (each prepared sample will
have a water mass of 100 g).
mw⋅
sw
m=−100 (1)
w
100
where
m is the mass of added water, in g;
w
m is the mass of sample, in g;
s
w is the mass fraction of water, in %.
w
NOTE Addition of water is important to have a fixed ratio (water acetone dichloromethane of 1:2:1,5). Under these
conditions, the organic phase will be the upper layer.
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SIST ISO 11264:2006
ISO 11264:2005(E)
6.4 Preparation of soil extract
6.4.1 Extraction and liquid/liquid distribution
Weigh 50 g of soil prepared according to 6.1 into a glass bottle (5.1) or glass cylinder (5.2.1), and add
m grams of water (4.1) and 200 ml of acetone (4.2). Close and shake for at least 6 h. Appropriate mixing of
w
the two phases shall be observed during shaking. Then add 30 g of sodium chloride (4.3) and 150 ml of
dichloromethane (4.4) or petroleum ether (4.5). Close and shake for 5 min.
Other extraction techniques, such as ultrasonic extraction, microwave or pressurised extraction, may be
suitable. However, if other extraction techniques are used, the comparability to
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 11264
Première édition
2005-05-01


Qualité du sol — Dosage des
herbicides — Méthode par CLHP avec
détection par UV
Soil quality — Determination of herbicides — Method using HPLC with
UV-detection




Numéro de référence
ISO 11264:2005(F)
©
ISO 2005

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ISO 11264:2005(F)
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Version française parue en 2007
Publié en Suisse

ii © ISO 2005 – Tous droits réservés

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ISO 11264:2005(F)
Sommaire Page
Avant-propos. iv
1 Domaine d'application. 1
2 Références normatives . 1
3 Principe. 1
4 Réactifs . 2
5 Appareillage . 4
6 Mode opératoire . 6
6.1 Préparation des échantillons. 6
6.2 Conservation et prétraitement des échantillons . 6
6.3 Ajout d'eau à l'échantillon. 6
6.4 Préparation de l'extrait de sol. 7
6.5 Dosage par CLHP. 7
7 Calculs . 10
7.1 Calcul de la concentration massique ρ de la substance dans l'extrait E2 à l'aide
EX
de l'Équation (2) . 10
7.2 Calcul de la teneur w de la substance dans l'extrait de sol E2 à l'aide de l'Équation (3). 11
7.3 Expression des résultats . 11
8 Rapport d'essai . 11
9 Justesse. 11
Annexe A (informative) Chromatogrammes . 12
Annexe B (normative) Validation.14
Annexe C (informative) Autres composants soumis à essai suivant la présente méthode (voir 6.4
et 6.5). 17
Bibliographie . 18

© ISO 2005 – Tous droits réservés iii

---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 11264:2005(F)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée
aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du
comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO 11264 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 190, Qualité du sol, sous-comité SC 3, Méthodes
chimiques et caractéristiques du sol.

iv © ISO 2005 – Tous droits réservés

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NORME INTERNATIONALE ISO 11264:2005(F)

Qualité du sol — Dosage des herbicides — Méthode par CLHP
avec détection par UV
1 Domaine d'application
La présente Norme internationale spécifie une méthode de chromatographie liquide à haute performance
(CLHP) pour le dosage qualitatif et quantitatif des herbicides dans différentes classes de substances
contenues dans le sol. Cette méthode traite des triazines ainsi que des métabolites qui leur sont associés,
des composés à base de phénylurées et d'autres herbicides. Les composés sont identifiés et quantifiés par
détection UV.
La limite de détection des triazines et des composés à base de phénylurées est d'environ 0,01 mg/kg de
matière sèche. Elle varie en fonction tant du composé que de la matrice du sol.
2 Références normatives
Les documents de référence suivants sont indispensables pour l'application du présent document. Pour les
références datées, seule l'édition citée s'applique. Pour les références non datées, la dernière édition du
document de référence s'applique (y compris les éventuels amendements).
ISO 10381-1, Qualité du sol — Échantillonnage — Partie 1: Lignes directrices pour l'établissement des
programmes d'échantillonnage
ISO 10381-2, Qualité du sol — Échantillonnage — Partie 2: Lignes directrices pour les techniques
d'échantillonnage
ISO 11465, Qualité du sol — Détermination de la teneur pondérale en matière sèche et en eau — Méthode
gravimétrique
ISO 14507, Qualité du sol — Prétraitement des échantillons pour la détermination des contaminants
organiques
3 Principe
Extraction d'un échantillon de sol humide à l'aide d'un mélange d'acétone et d'eau (2:1). Après addition de
NaCl et de dichlorométhane ou d'éther de pétrole, concentration de la phase organique isolée et transfert
dans un mélange d'acétonitrile et d'eau, puis, sans autre purification, analyse par chromatographie à haute
performance en phase inverse (CLHP – PI) avec gradient d'acétonitrile et d'eau et détection UV. Confirmation
des résultats par détecteur UV à barrette de diodes, chromatographie en phase gazeuse couplée à la
spectrométrie de masse (CPG-MS), chromatographie en phase gazeuse avec détecteur azote/phosphore
(CPG-NPD) ou à émission atomique (CPG-AED) (certaines méthodes pouvant nécessiter une dérivatisation).
© ISO 2005 – Tous droits réservés 1

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ISO 11264:2005(F)
4 Réactifs
Tous les réactifs doivent être de qualité analytique reconnue. La pureté des réactifs utilisés doit être vérifiée
par un dosage à blanc du type décrit en 6.5. Si la valeur du blanc est déraisonnablement élevée, c'est-à-dire
supérieure à 10 % de la valeur d'intérêt la plus basse, il faut en trouver la cause en analysant tout le mode
opératoire étape par étape. Pour les mesurages effectués à la limite de détermination, même des réactifs
adaptés à l'analyse des résidus peuvent ne pas respecter ce critère. Dans ce cas, des dosages de blanc
suffisants doivent être introduits dans chaque série d'échantillons.
4.1 Eau, pour analyse des résidus; l'eau du robinet (eau potable) est généralement utilisable.
4.2 Acétone, pour analyse des résidus.
4.3 Chlorure de sodium.
4.4 Dichlorométhane, pour analyse des résidus.
4.5 Éther de pétrole, pour analyse des résidus, plage d'ébullition de 40 °C à 60 °C.
4.6 Sulfate de sodium, anhydre, pour analyse des résidus.
4.7 Acétonitrile, qualité pour CLHP.
4.8 Eau, qualité pour CLHP.
4.9 2-Propanol, pour chromatographie.
4.10 Mélange acétonitrile (4.7)/eau (4.8), 1 + 1 (V + V) pour mise en solution de l'échantillon.
4.11 Méthanol, qualité pour CLHP.
4.12 Substances étalons (avec leur numéro CAS).
Alachlore [015972-60-8], Atrazine [001912-24-9], Atrazine-deséthyl [06190-65-4], Atrazine-désisopropyl
[01007-28-9], Bromacil [000314-40-9], Chlortoluron [015545-48-9], Chloroxuron [001982-47-4], Cyanazine
[021725-46-2], Dichlobénil [001194-65-6], Diuron [000330-54-1], Éthofumesate [026225-79-6], Hexazinone
[051235-04-2], Isoproturon [034123-59-6], Métazachlore [061729-08-2], Métamitrone [041394-05-2],
Métabenzthiazuron [018691-97-9], Métobromuron [003060-89-7], Métolachlore [051218-45-2], Métoxuron
[019937-59-8], Monuron [000150-68-5], Pendiméthaline [040487-42-1], Propazine [000139-40-2],
Propyzamide [023950-58-5], Sébuthylazine [00728-69-3], Simazine [000122-34-9], Terbutryne [000886-50-0],
Terbuthylazine [005915-41-3].
4.13 Solutions étalons pour dosage par CLHP.
4.13.1 Solutions mères, ρ = 1 mg/ml
11
Peser 10,0 mg de chaque substance étalon (4.12) et les placer dans des fioles jaugées de 10 ml (5.13).
Mettre en solution avec du 2-propanol (4.9) ou, dans le cas de la sébuthylazine et de la simazine, avec de
petites portions d'acétone (4.2) ou encore, dans le cas de la métamitrone, avec du méthanol (4.11).
Compléter ensuite au trait repère avec du 2-propanol (4.9).
4.13.2 Solutions intermédiaires, ρ = 100 µg/ml
12
Verser à la pipette 1,0 ml de chacune des solutions mères (4.13.1) dans une fiole jaugée de 10 ml (5.13) et
compléter au trait repère avec du 2-propanol (4.9).
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4.13.3 Solutions de travail I, ρ = 10 µg/ml
13
NOTE Les solutions de travail servent à déterminer le temps de rétention. Les concentrations sont différentes, car les
substances analysées ont des coefficients de réponse différents.
Verser à la pipette 1,0 ml de chacune des dilutions intermédiaires (4.13.2) dans une fiole jaugée de 10 ml
(5.13) et compléter au trait repère avec le mélange d'acétonitrile et d'eau (4.10).
4.13.4 Solutions de travail ll, ρ = 1 µg/ml
14
Transférer, à l'aide d'une microseringue (5.14), 100 µl de chacune des dilutions intermédiaires (4.13.2) dans
une fiole jaugée de 10 ml (5.13) et compléter au trait repère avec le mélange d'acétonitrile et d'eau (4.10).
4.13.5 Solutions de travail lll, ρ = 0,1 µg/ml
15
Transférer, à l'aide d'une microseringue (5.14), 100 µl de la solution de travail I (4.13.3) dans une fiole jaugée
de 10 ml (5.13) et compléter au trait repère avec le mélange d'acétonitrile et d'eau (4.10).
4.13.6 Solutions mixtes I, ρ = 5 µg/ml à 100 µg/ml
16
Conformément au Tableau 1, transférer, à l'aide d'une microseringue (5.14), entre 50 µI et 1 000 µl des
solutions mères (4.13.1) dans une fiole jaugée de 10 ml (5.13) et compléter au trait repère avec du 2-propanol
(4.9).
4.13.7 Solutions mixtes ll, ρ = 0,5 µg/ml à 10 µg/ml
17
Verser à la pipette 1,0 ml de la solution mixte I (4.13.6) dans une fiole jaugée de 10 ml (5.13) et compléter au
trait repère avec le mélange d'acétonitrile et d'eau (4.10) (voir Tableau 1).
4.13.8 Solutions mixtes III, ρ = 0,05 µg/ml à 1 µg/ml
18
Verser à la pipette 1,0 ml de la solution mixte ll (4.13.7) dans une fiole jaugée de 10 ml (5.13) et compléter au
trait repère avec le mélange d'acétonitrile et d'eau (4.10).
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Tableau 1 — Concentration des composés des solutions mixtes I (4.13.6), II (4.13.7) et III (4.13.8)
a b
N° Composé Volume Solution mixte I Solution mixte II Solution mixte III
 µl µg/ml µg/ml µg/ml
1 Atrazine-désisopropyl 200 20 2 0,2
2 Métamitrone 500 50 5 0,5
3 Atrazine-deséthyl 200 20 2 0,2
4 Hexazinone 200 20 2 0,2
5 Métoxuron 200 20 2 0,2
6 Bromacil 400 40 4 0,4
7 Simazine 100 10 1 0,1
8 Monuron 100 10 1 0,1
9 Cyanazine 100 10 1 0,1
10 Méthabenzthiazuron 100 10 1 0,1
11 Chlortoluron 100 10 1 0,1
12 Atrazine 100 10 1 0,1
13 Isoproturon 100 10 1 0,1
14 Diuron 200 20 2 0,2
15 Métobromuron 100 10 1 0,1
16 Métazachlore 500 50 5 0,5
17 Sébuthylazine 100 10 1 0,1
18 Propazine 100 10 1 0,1
19 Dichlobénil 200 20 2 0,2
20 Terbuthylazine 100 10 1 0,1
21 Chloroxuron 100 10 1 0,1
22 Propyzamide 100 10 1 0,1
23 Terbutryne 50 5 0,5 0,05
24 Éthofumésate 500 50 5 0,5
25 Métolachlore 500 50 5 0,5
26 Alachlore 1 000 100 10 1
27 Pendiméthaline 100 10 1 0,1
a
Les composés sont présentés dans l'ordre d'élution dans les conditions indiquées en 6.5. Pour d'autres composés, voir l'Annexe C.
b
Volume à prélever dans la solution mère (4.13.1) pour préparer 10 ml de la solution mixte I (4.13.6).
5 Appareillage
5.1 Ballons en verre, à bouchon à vis et à bague d'étanchéité en polytétrafluoréthylène, de capacité
nominale 250 ml et 1 000 ml.
5.2 Appareil d'extraction (voir Figure 1), comprenant les éléments suivants.
5.2.1 Une éprouvette graduée de 1 000 ml de volume nominal à col rodé et à bouchon en verre rodé.
5.2.2 Un insert en verre rodé (sur le principe de la pissette) à tube en U réglable, dont l'extrémité
coudée peut être placée à l'interface des deux phases.
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Légende
1 insert en verre rodé
2 éprouvette graduée
3 tube en U réglable
4 phase organique
5 phase aqueuse et sol
Figure 1 — Appareil d'extraction
5.3 Agitateur, à renversement ou horizontal, permettant d'obtenir un mélange homogène du sol et du
solvant d'extraction.
5.4 Évaporateur rotatif sous vide, avec bain d'eau et régulation du vide.
5.5 Ballon en forme de poire, de 10 ml de volume nominal, gradué en 0,5 ml et en 1,0 ml, avec bouchon
en verre rodé.
5.6 Membrane filtrante, de porosité minimale 0,45 µm, résistante au solvant.
5.7 Tube à essai, de 2 ml de volume nominal, obturable de façon étanche avec un disque en
polytétrafluoréthylène.
5.8 Appareil de CLHP, comportant des pompes haute pression à programmateur de gradient, une vanne
d'injection de 20 µl à 50 µl, un four thermostaté de colonne et un dispositif de dégazage du solvant.
5.9 Détecteur UV, à longueur d'onde variable ou détecteur à barrette de diodes (DAD).
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5.10 Dispositif d'enregistrement électronique (intégrateur ou micro-ordinateur de laboratoire).
5.11 Colonne de séparation, longueur = 250 mm, diamètre intérieur = 4 mm, et support de précolonne
(voir 6.5.1).
5.12 Précolonne, de longueur 4 mm, diamètre intérieur 4 mm (voir 6.5.1).
5.13 Fioles jaugées, de 10 ml de volume nominal, à bouchon en verre.
5.14 Microseringues, de 50 µl à 1 000 µl.
5.15 Bain à ultrasons ou mélangeur à vortex.
6 Mode opératoire
6.1 Préparation des échantillons
Prélever des échantillons représentatifs du sol humide, conformément à l'ISO 10381-1, en utilisant un appareil
d'échantillonnage conforme à l'ISO 10381-2.
6.2 Conservation et prétraitement des échantillons
Prétraiter les échantillons de sol humides conformément à l'ISO 14507 aussi rapidement que possible (sans
dessiccation chimique).
Conserver les échantillons à l'abri de la lumière à une température inférieure à −20 °C. Les herbicides
pouvant être sujets à conversion microbienne dans certaines conditions, il est recommandé de congeler les
échantillons si on les conserve plus de deux jours.
Déterminer les teneurs en eau et en matière sèche sur un sous-échantillon conformément à l'ISO 11465.
6.3 Ajout d'eau à l'échantillon
Ajouter à la masse de sol une masse spécifique d'eau calculée à l'aide de l'Équation (1) (chaque échantillon
préparé ayant une masse d'eau de 100 g).
mw⋅
sw
m=−100 (1)
w
100
où
m est la masse d'eau ajoutée, en g;
w
m est la masse de l'échantillon, en g;
s
w est la teneur en eau, en pourcentage (%).
w
NOTE L'ajout d'eau est important pour donner un rapport fixe (eau/acétone/dichlorométhane de 1:2:1,5). Dans ces
conditions, la phase organique est la phase supérieure.
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6.4 Préparation de l'extrait de sol
6.4.1 Extraction et répartition liquide-liquide
Peser 50 g de sol préparé conformément à 6.1 dans un ballon (5.1) ou une éprouvette en verre (5.2.1) et
ajouter m grammes d'eau (4.1) et 200 ml d'acétone (4.2). Fermer et agiter pendant au moins 6 h. L'agitation
w
doit entraîner une homogénéisation visible des deux phases. Ajouter ensuite 30 g de chlorure de sodium (4.3)
et 150 ml de dichlorométhane (4.4) ou d'éther de pétrole (4.5). Fermer et agiter pendant 5 min.
D'autres techniques d'extraction, telles que l'extraction aux ultrasons, aux micro-ondes ou sous pression,
peuvent être utilisées. Dans ce cas toutefois, leur comparabilité à la méthode décrite dans la présente Norme
internationale doit être prouvée.
Il convient de limiter au minimum inévitable l'utilisation de dichlorométhane en raison des risques sanitaires et
environnementaux. Le remplacement du dichlorométhane par de l'éther de pétrole (plage d'ébullition de 40 °C
à 60 °C) entraîne pour certains sols et composés des
...